Page 51 - Lab Bilology I 63

บทปฏบัติการท 3 การแบ่งเซลล ์ 39
ี�
ิ
Cell Division
ป ฏิบัติก า ร ชีว วิท ย า 1 | 35

การเตรียมสารเคมี
1. น้ํายารักษาเนื้อเยื่อ (fixative) ใช absolute alcohol 3 สวน ผสมกับ glacial acetic

acid 1 สวน
2. สียอม aceto-orcein ใชสี orcein (dye) จํานวน 2 กรัม ละลายกับ acetic acid
(45%) ปริมาตร 100 มล. ที่รอน ละลายเสร็จแลวทิ้งไวใหเย็นแลวกรองเอาสารละลายสี

ยอมเก็บใสขวดสีชาไวใช


วิธีการทดลอง
ตอนที 1 ศึกษาการแบงเซลลไมโตซิส (mitotic cell division)
่
ื
ื
ํ
้
ั
1. นาปลายรากหอมแชในนํายารักษาเน้อเย่อที่เตรียมเสร็จใหมๆ แชนาน 24 ชวโมง ลางราก
่
หอมดวย 70% เอธานอล กอนนําไปใชหรือเก็บในเอธานอล 70% แลวเก็บรักษาไวในตเย็น 4 องศา


ู

เซลเซียส จนกวาจะนํามาใช 
้
ิ
2. นํารากหอมดังกลาว 1 ชนมาวางบนสไลด ดังภาพที 3.7 ลางดวยน้ํากลั่น ซับน้ําออก ใชใบมีด
่
่
ุ
โกนตัดเอาเฉพาะสวนปลายรากหอมทีมีสีขาวขนยาวประมาณ 2 มิลลิเมตร

้

3. หยดสารละลายกรดเกลือ 5% จํานวน 1-2 หยดลงบนรากหอม ทิงไวประมาณ 3-5 นาที ซับ

ํ
้
่
สารละลาย กรดเกลือออก ตอจากนันลางรากหอมดวยน้ากลัน 2 ครั้งๆ ละ 5 นาที แลวใชกระดาษทิช
ชูซับใหแหง
3. ยอมสีดวย 1% aceto-orecin โดยหยดสีลงบนรากหอม 1-2 หยด ทิ้งไวประมาณ 5 นาที นํา
ึ
สไลดไปลนไฟออนแบบลนผานเปลวไฟ 2-3 ครั้ง เพ่อใหรากติดสีดีย่งข้น แตระวังอยาใหเดือดและสี
ิ
ื
แหง


5. ปดสไลดดวยกระจกปดสไลด ใชน้วหัวแมมือกดลงบนแผนสไลดตรงตําแหนงที่มีปลายราก
ิ

ั
หอมใหเซลลกระจายและแยกออกจากกัน (ระวงอยากดแรงเกินไปเพราะเซลลอาจแตกและทับกันได)
ซับสีสวนเกินออก
6. นําสไลดไปตรวจดูใตกลองจุลทรรศนที่กําลังขยายของเลนสใกลวัตถุ 10x และ 40x

7. สังเกตโครโมโซมระยะตางๆ ของการแบงเซลลไมโตซิส บันทึกผล

บทปฏิบัติการที่ 3 การแบงเซลล (Cell Division)