Page 31 - ปฏิบัติการ Lab Bilology II
P. 31
์
้
ี�
บทปฏบัติการท 2 กระบวนการสังเคราะหดวยแสงและการหายใจระดับเซลล ์
ิ
Photosynthesis and Cellular Respiration 23
2. กระบวนการสลายอาหารแบบไมใช O 2
ิ
ิ
ในภาวะที่ออกซิเจนไมเพียงพอที่จะรับอเล็กตรอนจากกระบวนการถายทอดอเล็กตรอน ทาให
ํ
NADH และ FADH 2 ไมสามารถถายทอดอิเล็กตรอนไปใหกับตัวรับอิเล็กตรอนได จึงไมเกิด proton gradient
+
+
และไมสามารถสราง ATP ได ดังนั้น จึงเกดภาวะขาดแคลน NAD และ FAD ซึ่งจะมีผลยับยั้ง glycolysis ได
ิ
+
ี
็
แตเซลลกมกระบวนการผัน NADH ใหเปน NAD และสราง ATP ออกมาไดโดยกระบวนการสลายอาหารแบบ
-
ไมใชออกซิเจน ซึ่งเปนการสรางสารพลังงานจากการสลายอาหารโดยตรง ไมมการถายทอด e ผลผลิตทีได คือ
ี
่
alcohol หรือ lactic acid สวน CO 2 อาจเกิดหรือไมเกิดก็ไดแลวแตปฏิกิริยา ดังสมการตอไปนี้
+
C 6 H 12 O + 2 ADP 2 Pi → 2 CH 3 CH 2 OH + 2 CO + 2 ATP หรือ
2
6
+
C 6 H 12 O + 2 ADP 2 Pi → 2 CH 3 CHOHCOOH
6
้
ั
ิ
ในการทดสอบปฏิกิริยาที่เกิดขึ้น อาจทําไดโดยใหสารตั้งตนหรือตัวยับยั้งปฏิกริยาตามขนตอน
ตางๆ กน ทาใหทราบวากระบวนการนันประกอบดวยปฏิกรยาใดบาง ในการทดลองครังนี้ ใชกลูโคสเปนสาร
้
้
ํ
ิ
ั
ิ
่
ี
ั
ิ
ี
ื
ตงตนและใช methylene blue เปนตวรับไฮโดรเจนอะตอม สําหรับปฏิกริยาทมการถายทอดไฮโดรเจน เม่อ
ั
้
methylene blue อยูในรูป reduced form จะเปลียนไปเปนสารทไมมสี และสารละลาย sodium fluoride
่
่
ี
ี
ี่
(NaF) ทําหนาทเปนตัวยับยั้งการทํางานของ enzyme enolase ใน glycolysis pathway
กิจกรรมที่ 2.4 การสลายกลูโคส
วัตถุประสงค
เพื่อศึกษาปฏิกิริยาการหายใจและการถายทอดอิเล็กตรอน
วัสดุอุปกรณ
1. Dry yeast 4 กรัม
2. น้ํากลั่น
3. สารละลาย glucose เขมขน 1 M
4. สารละลาย sodium fluoride เขมขน 1 M
5. Fermentation tube 3 หลอด
6. Test tube ขนาด 50 มล. 3 หลอด
ั
7. ปเปตขนาด 1 มล. 5 มล.และ 10 มล. ขนาดละ 1 อน
ั
8. กระบอกตวงขนาด 100 มล. 1 อน
วิธีทดลอง
ิ
้
่
ํ
1. นํา dry yeast 4 กรัม มาละลายในน้ากลัน 140 มล. จากนันเตมสารละลาย glucose ความ
เขมขน 1 โมล จํานวน 60 มล. เขยาประมาณ 3 นาท จะได yeast suspension
ี
2. แบง yeast suspension ออกเปนเปน 4 สวนเทาๆกัน ในบกเกอรขนาด 50 มล.
ี
3. นําสวนแรก ไปใสใน fermentation tube หลอด ก ที่ทําเครื่องหมายกํากับไว
่
ั
4. สวนท 2 เตมสารละลาย sodium fluoride ลงไป 0.75 มล. คนใหเขากน แลวนําไปใสใน
ี
ิ
fermentation tube หลอด ข
ั
ิ
5. สวนท 3 เตมสารละลาย sodium fluoride ลงไป 2.5 มล. คนใหเขากน แลวนําไปใสใน
่
ี
fermentation tube ลงในหลอด ค เมอเสร็จแลวจะไดความเขมขนของสารในหลอดทง 3 ดงนี้ หลอด ก
่
ั
้
ั
ื
glucose 0.3 M., หลอด ข glucose 0.3 M.+NaF 0.015 M. และ หลอด ค glucose 0.3 M + NaF 0.05 M.
