Page 28 - ปฏิบัติการ Lab Bilology II

ี
ิ
ี
์
ปฏบัติการชววิทยา 2 [Biology Laboratory 2] ภาควิชาชววิทยา คณะวิทยาศาสตร มมส.
20 อ.วนชย สงฆสข
ั
ั
ั
ุ
์
วิธีทดลอง
ี
1. ใช capillary tube ดดสารละลายรงควัตถจากการทดลองท่ 2.1 โดยใหสารละลายรงควัตถ ุ
ุ
ู


คางอยูใน capillary tube สูงประมาณ 2 ซม. แลวลากปลายลางของ capillary tube ไปบน
ี
ี
chromatographic paper ทเตรียมไว ใหเปนแนวเสนตรง ตามแนวเสนดนสอทขดไว โดยลากใหตลอดความ
่
ี
่
ิ

ิ

ุ
กวางของกระดาษ ท้งไวใหแหงแลวทาซาใหม 3-4 ครัง หรือจนกระทงรงควัตถตดหนาจนเห็นไดชัดเจน ทงให
ิ
้
ํ
้

ิ
่
ํ
้
ั
แหงสนิท
2. นํา chromatographic paper มาเก่ยวเขากับปลายลวดท่จุกยางของหลอดทดลอง โดยให
ี
ี

ั
ํ
ปลายแหลมของกระดาษหอยลง ปดจุกหลอดทดลองใหแนน ใหปลายแหลมของกระดาษจุมลงในตวทาละลาย
ุ

ี
ั
้
่
ํ
(petroleum ether : acetone; 92:8 (v/v)) และใหแนวรงควัตถอยูเหนือระดบตวทาละลาย (ภาพท 2.2) ตง
ั
ั
ทิ้งไวนิ่งๆ
3. สังเกตการเคลื่อนที่ของตัวทําละลาย ซึ่งจะแยกรงควัตถุชนิดตางๆ ออกจากกัน
ี
ึ
4. เม่อแนวของตวทาละลายเคลื่อนทใกลจะถงขอบบนสุดของ chromatographic paper
ั
ื
่
ํ
ี
่
ึ
ี
ดงจุกหลอดทดลอง ออก แลวนํา chromatographic paper ออกจากลวดทเก่ยว วัดระยะทางการเคลือนท ่ ี
่
ุ
ของตัวทําละลายและรงควัตถที่แยกไดตามสีที่มองเห็นจริง
5. คํานวณคา Rate of flow (R f) และระบุชนิดของรงควัตถุโดยเปรียบเทียบกับตาราง

R f = ระยะทางที่รงควัตถุตัวที่ 1 (2, 3, ...) เคลื่อนที่ไปบนกระดาษ
ระยะทางที่ตัวทําละลายเคลื่อนที่ไปบนกระดาษ

คา R f ชนิดของรงควัตถ ุ
1 Carotene
0.5 – 0.65 Xanthophyll
0.35 chlorophyll a
0.2 chlorophyll b

ี่
ุ
ภาพท 2.2 การจัดตั้งอุปกรณในการแยกรงควัตถ โดยวิธี paper partition chromatography