Page 111 - ปฏิบัติการ Lab Bilology II

ี�
ี
บทปฏบัติการท 9 การแยกสกัดดเอ็นเอและพันธุวิศวกรรม
ิ
DNA Extraction and Genetic Engineering 103
ยาวของดีเอ็นเอเพียง 1.1 มิลลิเมตร ดังนั้นในสิ่งมชีวิตพวกยูคาริโอตจึงตองมการจัดระบบในการบรรจุดเอ็นเอ
ี
ี

ี
อยางมีระบบและเปนระเบียบใหมากที่สุด
ํ
็
ี

จากการทสิงมชีวิตพวกยูคาริโอตและโปรคาริโอตมีความยาวของดีเอนเอแตกตางกันมากจึงทาใหใน
ี
่
่
ั
่
ี
ึ
ี
็
ขนตอนของการแยกสกดดเอนเอจากยูคาริโอตซงมความยาวมาก ๆ จําเปนตองทําดวยความระมัดระวังเพ่อ
ั
้
ื
ี
ปองกันการฉีกขาดและการเสียสภาพธรรมชาติของดีเอ็นเอ เพราะการที่เกิดการฉกขาดหรือเสียสภาพยอมมผล
ี
โดยตรงตอโครงสรางและหนาที่ของดีเอ็นเอได 

็
ั
ภาพที่ 9.5 ลักษณะของดีเอนเอเกลียวคูที่เขารวมกบโปรตีนฮีสโตนแลวมีการมวนพับอยางมีระเบียบทําใหเกิด
ี่
เปนโครงสรางทเรียกวาโครโมโซม (ที่มา: Russell, 2000)

สมบติของกรดนิวคลีอก กรดนิวคลีอกละลายน้าไดดในสภาวะทเปนกลาง (pH 7.0) หรือกรดออน
ิ
ี
ํ
ั
่
ี

ิ
้
ั

โมเลกุลโดยรวมมีประจุเปนลบจากหมูฟอสเฟตที่เปนองคประกอบของกรดนิวคลีอิก ดงนันดเอนเอทละลายอยู 
่
็
ี
ี
ํ
ี
ี
่
ุ
ั
บพเฟอรท่ม pH 7.0 จึงมีความหนืดสูงเนืองจากมการผลักกันของประจุลบ ทาใหโมเลกลของกรดนิวคลีอก
ี
ิ
ั

ี
ี
ี
เหยียดตัวออก จากคุณสมบัติดังกลาวจึงทําใหดีเอ็นเอมีความสามารถในการจับกบโปรตนท่มประจุบวกได เชน
ี
่
็
้
่
ี
ี
ี

ํ
ั
โปรตนฮสโตน นอกจากนีในสภาวะทมีอณหภูมิสูงหรือเปนดางมากทาใหพนธะไฮโดรเจนทยึดระหวางดเอนเอ
ี
ุ
ี
็
ํ
ํ

ู
ทง 2 สายถกทาลายทาใหไดเปนดเอ็นเอสายเดยว 2 สาย หรือเรียกอีกอยางหนึ่งวาเกดการเสียสภาพของดเอนเอ
้
ั
่
ิ
ี

ี
(DNA denaturation) อยางไรก็ตามสามารถทําใหดีเอ็นเอเกิดการรวมตัวกันเปนกอนเพอใหเกดการตกตะกอน
ื่
ิ
ได เชน การเติมสารพวกแอลกอฮอล