Page 61 - ปฎิบัติการชีววิทยา 1

บทปฏบัติการท 4 เอนไซม ์
ิ
ี�
Enzyme
ปฏ บั ต การชี วว ทยา 1 | 43 49
ิ
ิ
ิ
4
|
|
3
ปฏ บั ต การชี วว ทยา 1 | 43 43
ิ
ต
วว
ต
การช
ิ
ปฏ
ิ
การช
ั
ี
ิ
บ
ั
ิ
ิ
ปฏ
บ
1
1
ิ
ทยา
ทยา
ิ
ิ
วว
ี
ปฏ บั ต การชี วว ทยา 1 | 43
ิ
ิ
ิ
ํ
้
้
็
ํ
ํ
่
็
้
2. กรองกากออก นานาทีได (เอนไซม) ใส่ในขวดสีชาและเกบไวในถงนาแขง ็
ั
้
์
กรองกากออก
็
บไว
าน
ส
่
ํ
ชาและเก
้
าน
ํ
ํ
ี
้
ํ
าท
่
ในขวดส
ี
ชาและเก
บไว
์

ํ
็
็
)
น
ี
ส
ในขวดส
่
ใ
็
กรองกากออก
็
(
ง
้

์
)
ํ
ด
้
ด
เอนไซม
่
ี
ไ
2.
้
เอนไซม
้
2. กรองกากออก นานาทีได (เอนไซม) ใส่ในขวดสีชาและเกบไวในถงนาแขง าแขง
(
์
้
ในถ
งน
ั
ั
2.
้
่
้
ไ
ในถ
้
าแข
้
งน
ใ
ั
ํ
าท
ํ
น
ํ
้
์
ํ
้
2. กรองกากออก นานาทีได (เอนไซม) ใส่ในขวดสีชาและเกบไวในถงนาแขง
้
ั
ํ
ํ
้
็
่
้
็
้
่
ึ
้
ั
ิ
ิ
ิ
่
การทดลองในบทนจะตรวจสอบปฏกรยาทีเกดขนระหวางซับสเตรตกับเอนไซม ดงภาพดานล่าง ่
ี
ิ
้
์
้
ิ
้
จ
ฏ
ต
ี
ะ
ี
้
จ
อ
ร
ิ
ส
ว
ป
จ
ร
บ
จ
ส
ฏ
อ
ก
ิ
ะ
ี
ร
ว
ต
บ
ิ
ป
บเอนไซม
ั
บเอนไซม
ก
์
ด
ั

์
ต
ร
เ
ต
ส
ต
ร
ั
ต
ก
ั
้
านล
า
พด
้
าง
่
้
านล
ภ

ภ
ง
์
ด
ง
พด
า
ั
ั
่
ิ
เก
ี
ิ
่
เก
ดข
ี
่
ิ
ก
ยาท
ิ
ิ
ยาท
ิ
ร
ิ
ึ
างซ
่
่
างซ
บ
บ
เ
ั
ส
่
้
้
ึ
นระหว
ดข
ึ
นระหว
ิ
้
การทดลองในบทนจะตรวจสอบปฏกรยาทีเกดขนระหวางซับสเตรตกับเอนไซม ดงภาพดานล่าง าง
การทดลองในบทน
การทดลองในบทน
่
ี
การทดลองในบทนจะตรวจสอบปฏกรยาทีเกดขนระหวางซับสเตรตกบเอนไซม ดงภาพดานล่าง
ิ
้
้
ิ
ิ
ึ
่
์
ั
้
ั
ิ

ิ
้
ิ
ั
ี
่
ั
ิ
้
ภาพท 4.2 แสดงปฏกรยาการรวมตวของสารตงตนกบเอนไซม์
ิ
ภาพท 4.2 แสดงปฏกรยาการรวมตวของสารตงตนกบเอนไซม ั ั ั์ ั
ิ
ิ
ั
่
่
ั
่
ีี 4.2 แสดงปฏิกรยาการรวมตัวของสารตังต้นกบเอนไซม์ ี 4.2 แสดงปฏิกรยาการรวมตัวของสารตังต้นกบเอนไซม์
ั
่
ภาพท 4.2 แสดงปฏกรยาการรวมตวของสารตงตนกบเอนไซม์
้
ภาพทภาพท
้
ิ
้
ี
ิ
ิ
้
้
ั
้
ิ
ิ
ิ
ั
ิ
(ดดแปลงจาก Eldon D. Enger และ Frederick C. Ross. 2009)
ั
ั
(ดดแปลงจาก Eldon D. Enger และ Frederick C. Ross. 2009)
(ดดแปลงจาก Eldon D. Enger และ Frederick C. Ross. 2009)
ั (ดัดแปลงจาก Eldon D. Enger และ Frederick C. Ross. 2009) (ดัดแปลงจาก Eldon D. Enger และ Frederick C. Ross. 2009)

่
้
ตารางบันทกความเขมของสีทเกดขนจากสารผลตภัณฑ
ี
ึ
ิ
้
ึ
ึ
้
ตารางบันทกความเขมของสีทเกดขนจากสารผลิตภัณฑ ์ ิ ิ ิ ิ ์ ์
ิ
ี
่
้
ึ
ึ
ตารางบ
้
ี
่
ึ
ึึกความเขมของสีทเกิดขนจากสารผลตภัณฑ์
ิ
้
ี
้
ตารางบันทกความเขมของสีทเกดขนจากสารผลตภัณฑ
่
้
้
ึิดขนจากสารผลตภัณฑ์
ี
่
ตารางบันทันทกความเขมของสีทเก
ึ
้
ํ
่
่
้
สีนาตาลเหลือง
ํ
้
สีทีปรากฏ สีไม่เปลียนแปลง
่
่
สีทีปรากฏ ่ สีไม่เปลียนแปลง สีเหลืองอ่อน ่ ่่อน ่ สีเหลือง สีนาตาลเหลือง ้ ํ
สีเหลืองออน สีเหลือง
สีนาตาลเหลือง
สีเหลือง
สีเหลือง
่
้
้ สีนาตาลเหลือง
่สีทีปรากฏ
สีไม่เปลียนแปลง
ํ
ํสีนาตาลเหลือง
สีไม่เปล
สีทีปรากฏ
สีเหลือง
่ สีทีปรากฏ
สีเหลืองออน
สีไม่เปลียนแปลง
่
สีเหลืองอ
่ียนแปลง
สีเหลืองออน
่
ั
่
้
คาทีใชบนทก
่
คาทีใชบนทก ้ ้ ้ บ ใ ่ ี ั ั ั นท ั ึ ึ ก ึ 0 0 0 + + ++ ++ +++ +++
ึ
่
คาทีใชบนทกนทก
++ ++++
ค
+ + +
่
่
ี
่
าท
ใ
ช
ช
าท
้
บ
+++
0
ึ
0
++++++
่ ค
่
่
หมายเหต: ใชคาในตารางไป port กราฟ o กราฟ
ุ
้
่
้
หมายเหต: ใชคาในตารางไป port กราฟ
ุ
ช
้
ค
ค
o
้
าในตารางไป
ช
่
้
p
:
ุ

ใ
หมายเหต
หมายเหต: ใชคาในตารางไป port กราฟ กราฟ
t
p
าในตารางไป
ใ
r
่
t

:
ุ
r
่
หมายเหต
ุ
้
ู
หลังจากเตมเอนไซมลงไปในสารละลายสับสเตรต อาจมีสีชมพปรากฏขน สีดงกล่าวไม ่ ่
หลังจากเตมเอนไซมลงไปในสารละลายสับสเตรต อาจมีสีชมพปรากฏขน สีดงกล่าวไม
์
่
ั
ิ
ึ
ู
์
ึ
้
ิ
ั
หลังจากเต
ั
้
ึ
ิิมเอนไซม์ลงไปในสารละลายสับสเตรต อาจมีสีชมพูปรากฏขึน สีดังกล่าวไม
ู
หลังจากเตมเอนไซมลงไปในสารละลายสับสเตรต อาจมีสีชมพปรากฏขน สีดงกล่าวไม่หลังจากเตมเอนไซม์ลงไปในสารละลายสับสเตรต อาจมีสีชมพูปรากฏขึน สีดังกล่าวไม่
้
ิ
้
์
่
์
้
ิ
ิ
ั
ั
ิ
้
่
เกยวข้องกบการทดลอง ปฏกรยาทีเกดขนระหวางเอนไซม tyrosinase กบ pyrocatechol จนไดสาร ้ ้
ิ
ึ
ี
่
ึ
้
่
่
่
ั
เกยวข้องกบการทดลอง ปฏกรยาทีเกดขนระหวางเอนไซม tyrosinase กบ pyrocatechol จนไดสาร
ั
ิ
ี
ิ
์
ิ
ิ
ิ
ิ
ึ
ั
้
ั
ี เกยวข้องกับการทดลอง ปฏิกรยาทีเกดขนระหว่างเอนไซม์ tyrosinase กบ pyrocatechol จนได้สารเกยวข้องกับการทดลอง ปฏิกรยาทีเกดขนระหว่างเอนไซม์ tyrosinase กบ pyrocatechol จนได้สาร
ี
ิ
่
ั
่
่
เกยวข้องกบการทดลอง ปฏกรยาทีเกดขนระหวางเอนไซม tyrosinase กบ pyrocatechol จนไดสาร
่
ั
ี
้
ิ
ิ
ิ
ึ
ึ
้
่
่
์
ิ
ิ
่
ิ
ิ
์
ั
ั
ผลิตภณฑทีมีสีนาตาลเหลอง ความเขมของสีทีปรากฏในหลอดทดลองจะสัมพนธโดยตรงกบปรมาณ ั ิ
่
์
ั
ํ
ิ
ื
้
้
่
ื
ผลิตภณฑทีมีสีนาตาลเหลอง ความเขมของสีทีปรากฏในหลอดทดลองจะสัมพนธโดยตรงกบปรมาณ
้
ํ
้
์
่
์
ั
ั
่
่
่
ผลิตภณฑทีมีสีนาตาลเหลอง ความเขมของสีทีปรากฏในหลอดทดลองจะสัมพนธโดยตรงกบปรมาณ
้
์
์
ผลิตภตภ
์
้
้
ํ
ผล
ํ
ิ
่
ํ
ััณฑทีมีสีนาตาลเหลือง ความเข้มของสีทีปรากฏในหลอดทดลองจะสัมพันธ์โดยตรงกับปรมาณัณฑทีมีสีนาตาลเหลือง ความเข้มของสีทีปรากฏในหลอดทดลองจะสัมพันธ์โดยตรงกับปรมาณ
ิ
ของสารผลตภณฑ ิ ิิตภัณฑ ิตภัณฑ ์ ื ้ ่ ่ ่ ั ์ ั ิ ิ ิ
ั
์
์
ของสารผลตภณฑ
ั
ของสารผลของสารผล
์
์
ั
ของสารผลตภณฑ

ุ
อปกรณ ุ ์ ์
อปกรณ
์
ุ อุปกรณ อุปกรณ
์
อปกรณ
์
1. หลอดทดลองขนาด 20 มล จานวน 16 หลอด 8. อางน้ารอน
้
ํ
่
ํ
1. หลอดทดลองขนาด 20 มล จานวน 16 หลอด 8. อางน้ารอน ้
ํ
ํ
่
้
8. อ8.
หลอดทดลองขนาด
้
ํ
ํ
8. อางน้ารอน
่่างน้ารอน อ่างน้ารอน
ํ
ํ
20
้
ํํานวน 16 หลอด จานวน 16 หลอด
1.
1. หลอดทดลองขนาด 20 มล จมล
1. หลอดทดลองขนาด 20 มล จานวน 16 หลอด
2. ทีวางหลอดทดลอง (rack) 9. นาแขง
ํ
้
็
่
้
่
2. ทีวางหลอดทดลอง (rack) 9. นาแขง ็
็
ํ
่
ํ
2. ทีวางหลอดทดลอง (rack)
้้าแขง นาแขง
2. ท2.
ํ
็
่
9. น9.
่ีวางหลอดทดลอง (rack) ทีวางหลอดทดลอง (rack)
ํ
9. นาแขง
้
็
3. สับสเตรต (pyrocatechol) 10. กรด HCL
3. สับสเตรต (pyrocatechol) 10. กรด HCL
10.
10. กรด HCL
ั
ส
3.
10. กรด HCL HCL
บสเตรต
3. สับสเตรต (pyrocatechol) (pyrocatechol)
กรด
3. สับสเตรต (pyrocatechol)
ั
์
4. หวมันฝรง (เอนไซม) 11. สารละลาย NaOH
ั
่
่
ั
์
4. หวมันฝรง (เอนไซม) ์ 11. สารละลาย NaOH
ั
่
ั
ััวมันฝรง (เอนไซม์) หวมันฝรง (เอนไซม)
์
4. หวมันฝรง (เอนไซม)
4. ห4.
ั
ย
11.
่
สารละลา
ั
่
11. สารละลาย NaOH NaOH
ั
11. สารละลาย NaOH
่
่
ี
้
่
ํ
ั
5. นากลัน และนากลันทปรบ pH 3, 5, 7,9 และ 11 12. เครองบด
ํ
ื
่
้
้
ี
ํ
่
่
่
ํ
ั
่
5. นากลัน และนากลันทปรบ pH 3, 5, 7,9 และ 11 12. เครองบด
ื
้
้้ากลัน และนากลันทีปรบ pH 3, 5, 7,9 และ 11 12. เครองบด 12. เครองบด
้
ํ
ํ
ํ
ํ
ั
้
้
ํ
่
่
่
ํ
้
่
่
่
ื
ีันทีปรบ pH 3, 5, 7,9 และ 11
ั
่
่
5. น5. นากลัน และนากล
่
ื
่
ื
5. นากลัน และนากลันทปรบ pH 3, 5, 7,9 และ 11 12. เครองบด
ั
่
่
ํ
6. สารละลายนาตาลซูโครส 13. ผ้าขาวบาง
้
6. สารละลายนาตาลซูโครส 13. ผ้าขาวบาง
้
ํ
ล
6. สารละลายนายน
ํ
สารละ
้
ํ
6. สารละลายนาตาลซูโครส
ผ
6.
้้าตาลซูโครส ้าตาลซูโครส
13. ผ้าขาวบาง าขาวบาง
ํ
13.
13. ผ้าขาวบาง
7. กระดาษลิตมัส (Litmus) 14. นาฬกาจับเวลา
ิ
ิ
7. กระดาษลิตมัส (Litmus) 14. นาฬกาจับเวลา
ล
14. นาฬนาฬ
14. นาฬกาจับเวลา
14.
ก
ร
ษ
ั
ส
7.
า
ิิกาจับเวลา ิกาจับเวลา
ิ
7. กระดาษลิตมัส (Litmus) (Litmus)
ด
ะ
ตม
7. กระดาษลิตมัส (Litmus)
ิ
ั
์
ปฏิบตการที 4 เอนไซม (Enzyme)
่
ั
่
์
ิ
ปฏิบตการที 4 เอนไซม (Enzyme)
์
ปฏ
์
์
ิ
การท
่
ั
ต

่
่
ี
ี
เอนไซม

เอนไซม
ั
ั
บ
ต
บ
ปฏ
ิ
ิ
การท
ิ
ิ
ปฏิบตการที 4 เอนไซม (Enzyme) (Enzyme)

4

(Enzyme)
4